非洲豬瘟（ASF）是生豬養(yǎng)殖業(yè)的頭號威脅，其強傳染性與高死亡率可造成巨大經濟損失。快速、準確的早期檢測是防控疫情的關鍵。非洲豬瘟快檢儀作為核心工具，已廣泛應用于養(yǎng)殖場、屠宰場及檢驗檢疫環(huán)節(jié)。掌握其規(guī)范操作方法，不僅能提升檢測效率，更能為疫情預警和精準處置提供可靠依據。
 

　　一、檢測前的周密準備

　　1.樣本采集與處理

　　樣本質量直接決定檢測結果的可靠性。常見樣本類型包括：

　?、傺簶颖荆翰杉i只靜脈血后，靜置析出血清或使用抗凝血漿。需離心去除雜質，收集上清液。

　?、诮M織樣本：取少量組織勻漿后，用PBS緩沖液稀釋，離心取上清。

　?、劭诒?環(huán)境拭子：將棉簽深入豬只鼻腔或口腔旋轉取樣，浸入緩沖液混合后使用。

　　所有樣本需避免反復凍融，若含防腐劑NaN3需注意其可能影響酶反應。

　　2.儀器與試劑準備

　?、賰x器校準：開機前確保設備放置于水平臺面，通風口無遮擋，環(huán)境溫度保持在15–35℃。部分儀器需預熱以避免溫差干擾。

　?、谠噭┡渲疲焊鶕z測需求選擇配套試劑盒。試劑需平衡至室溫，濃縮洗滌液按比例稀釋。

　　實驗需備齊微量加樣器、離心管、封板膜等耗材，避免交叉污染。

　　二、規(guī)范操作流程與關鍵步驟

　　不同原理的快檢儀操作側重不同，但均需嚴格遵循流程：

　　1.熒光PCR快檢儀

　　①加樣與程序設置：將處理好的樣本與反應液加入PCR管，放置于儀器樣品艙。在觸摸屏上選擇預設程序，設置溫度與時間參數。

　?、谶\行與監(jiān)控：啟動后，儀器自動進行核酸擴增及熒光信號采集。操作員需實時觀察擴增曲線，確保反應正常。

　　③結果判讀：檢測完成后，軟件自動生成Ct值。Ct值越低，表明病毒載量越高。結果需與陰/陽性對照對比驗證。

　　2.ELISA免疫檢測儀（快速篩查）

　?、侔鍡l加樣：從試劑盒中取出預包被板條，依次加入陰性對照、陽性對照和待測樣本，并加入酶標記物。

　?、跍赜c洗滌：37℃避光溫育60分鐘后，用洗滌液清洗板孔5次，去除未結合物質。

　?、埏@色與測定：加入底物液避光反應15分鐘，再加入終止液。15分鐘內將板條放入儀器，在450nm波長下讀取OD值，分析樣本陰陽性。

　　三、注意事項與維護要點

　　1.避免污染：實驗區(qū)域應分區(qū)，操作中勤換手套，耗材一次性使用。

　　2.質量控制：每批次檢測均需設置陰/陽性對照，確保試劑有效性及操作準確性。

　　3.儀器維護：定期清潔樣品艙，檢查光學系統與加熱模塊。長期不用時斷電存放于干燥環(huán)境。

　　4.數據管理：結果導出保存?zhèn)浞荩阌谒菰磁c分析。部分儀器支持USB導出或直接打印報告。

　　結語

　　非洲豬瘟快檢儀是疫情防線上的“偵察兵”，其規(guī)范使用貫穿于樣本處理、精確操作及系統維護的全過程。無論是實驗室的熒光PCR儀，還是現場便捷的ELISA檢測儀，只有嚴格遵循流程，才能確保結果可靠，真正實現早發(fā)現、早處置，為生豬產業(yè)筑牢安全屏障。